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作为神经,大脑是运动,感觉,情感等生命活动的中心。因此,脑科学的研究对于理解和认识各种神经生理和病理过程的本质具有极其重要的意义。脑功能的神经信号传递绝大多数需要多种神经化学物质的共同参与,包括神经递质(如儿茶酚胺、谷氨酸,y-------,北京脑化学物质实时分析系统,---、神经肽等)神经调质(如抗坏血酸等),能量物质(如---、乳酸、atp等),离子(如h.k* ,na,ca*,ci等)以及其它重要的神经分子(如h,脑化学物质实时分析系统原理,o, ,h,s,no等)[1.2]。因此,建立和发展新的分析化学的原理和方法,在层次实现脑化学的动态监测,将---推动对脑功能和脑---分子机制的研究。
神经系统中存在着一类重要化学物质,如---[)、atp1%1 ,y-------r等,既没有电化学活性,也缺少相对应的氧化酶或脱氢酶识别元件,利用一般的电化学生物传感原理很难实现其直接检测。因此,多酶串联反应的电化学生物传感器应运而生。如---的传感分析可同时利用---酯酶(acetylcholine oxidase,ache)和氧化酶(choline,chox ) ,通过检测酶促反应过程中h,0。的生成量实现---的传感分析。但是,在神经系统中,除抗坏血酸、尿酸等具有电化学活性的物质外,细胞间液中的浓度比---的浓度一般高1000倍左右,这些物质都会干扰---的测定。因此,消除和抗坏血酸的干扰是---分析的关键。niwa等!r]在微透析取样-在线电化学检测系统研制的过程中,在---电化学传感器的上游引入固定有氧化酶和------酶( catalase )的微柱,先将及其氧化产生的h,0,消耗掉,从而避免对---的干扰。为了降低抗坏血酸的干扰,他们在ache-chox/os-gel-hrp修饰层上修饰了nafion 膜,脑化学物质实时分析系统公司,阻止带负电荷的抗坏血酸向电极表面扩散。基于此,他们建立了---的高选择在线电化学分析方法,在大鼠海马脑切片上,脑化学物质实时分析系统在线咨询,成功检测到电------的胞外---浓度的升高。
除上述方法外,背景扣除的方法也能消除干扰。gerhardt研究组[誓~8]在阵列电极上设计自参照电极,将其电流信号作为背景信号,在具体的分析测定中予以扣除,这种方法可消除在相同的极化电位下其它物质对谷氨酸氧化酶修饰电极的干扰。他们首先在电极表面修饰一层nafion ,避免抗坏血酸的干扰;随后,利用和牛白蛋白(bovine serum albumin ,bsa)交联法将谷氨酸氧化酶固定至阵列电极表面,用于记录氧化电流的总和;相邻的自参照位点仅修饰bsa和,用于记录背景氧化电流。二者电流之差用于谷氨酸的定量分析(图1a)。他们利用局部谷氨酸的模型,成功地将该生物传感器用于鼠脑谷氨酸原位的实时监测,并实现了自由活动大鼠在静息状态及应激压力下脑内谷氨酸的长期监测。
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